|
Для выяснения участия ФИ-3-К в АЦ сигнальном механизме действия пептидов инсулинового суперсемейства (инсулина и ИФР-1) был использован специфический ингибитор этого фермента - вортманнин. Инкубация мышечных мембран крысы и моллюска с вортманнином (10-9–10-7М) несколько снижает базальную активность АЦ (таблица 8). В отсутствии ингибитора инсулин и ИФР-1 отчетливо стимулируют активность АЦ. Между тем, АЦ стимулирующий эффект инсулина и ИФР-1 снижается в зависимости от концентрации ингибитора (10-9–10-7М). Ингибирующее действие вортманнина было наиболее выражено при концентрации 10-7М (таблица 8). Установленные факты свидетельствуют об участии ФИ-3-К в АЦ сигнальном механизме действия инсулина и ИФР-1 в мышечных тканях изучаемых объектов.
Таблица 8. Влияние вортманнина (10–9М–10–7М) на стимуляцию ИФР-1 (10–8М) и инсулином (10–8 М) активности АЦ в мембранной фракции скелетных мышцах крыс и гладких мышц моллюска Anodonta cygnea |
Активность АЦ (пкмоль цАМФ/мин/мг белка) | |
объекты |
|
Крысы |
|
|
Моллюски |
| |
воздействия |
без пептида |
ИФР-l |
инсулин |
без пептида |
ИФР-l |
инсулин | |
без ворманнина |
21±1.6 |
38.2±1.0* |
41.4±2.3* |
17.8±1.0 |
41.1±2.6* |
24.5±1.0* | |
+вортманнин
10–9М |
17.9±2.0 |
9.4±1.3 |
9.7±1.4 |
15.8±2.0 |
14.6±1.3 |
14.2±0.4 | |
+вортманнин
10–8М |
16.5±2.3 |
8.6±1.3 |
8.4±1.3 |
14.6±2.3 |
13.9±0.8 |
11.6±1.0 | |
+вортманнин
10–7М |
13.2±1.9 |
6.3±0.9 |
6.8±0.8 |
14.3±0.9 |
13.8±1.8 |
7.4±0.5 |
Примечание: значения активности АЦ в присутствии пептидов, достоверно отличающиеся от активности фермента в отсутствии пептидов (р<0.05), отмечены звездочкой.
Для проверки гормоноспецифичности ингибирующего действия вортманнина на АЦ стимулирующие эффекты инсулина и ИФР-1 были использованы изопротеренол и серотонин, гормоны неродственные пептидам инсулиновой природы и реализующие действие через рецептор серпантинного типа, не связанный с ФИ-3-К сигнальной системой. Результаты этих опытов показали отсутствие влияния вортманнина на катехоламинчувствительную АЦ сигнальную систему (данные приведены в диссертации). Этот факт указывает на участие ФИ-3-К в, обнаруженным нами, АЦ сигнальном механизме действия инсулина и ИФР-1.
|